Sanger测序技术又被称为双向测序，主要是通过DNA聚合酶的作用，对模板链进行延伸，同时使用放射性同位素（如P32或P35）标记的四种特殊核苷酸（分别是尿嘧啶、鸟嘌呤、胸腺嘧啶和胞嘧啶）对延伸出来的每一种核苷酸进行检测。 在聚合酶延伸的过程中，一旦出现错误的核苷酸，则会引起下一次测序的反应，并且可以非常简便地通过放射自显影技术确定出错误的核苷酸。 需要注意的是，Sanger测序法虽然应用较为广泛，但是其需要使用到放射性同位素，因此具有一定的局限性。