定义
正置生物显微镜（Ｕｐｒｉｇｈｔ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｓｃｏｐｅ）是一种光学显微镜，其物镜位于样本上方，照明系统位于样本下方。主要观察透射光下的薄样本（如组织切片、细胞涂片等），是生物学、医学、病理学等领域的基础科研与诊断工具。
核心结构与功能
１． 光学系统
物镜（核心部件）：
位于样本上方，通常配备４×、１０×、４０×、１００×（油镜）等多级放大镜头。
数值孔径（ＮＡ）：决定分辨率（ＮＡ越大，分辨率越高）。
目镜：
标准为１０×或１５×，与物镜组合实现总放大倍数（例：４０×物镜 ＋ １０×目镜 ＝ ４００×）。
聚光镜：
位于样本下方，聚焦光线至样本，配备孔径光阑（调节对比度）和视场光阑（减少杂光）。
２． 机械系统
载物台：
固定玻片，可手动／电动操控Ｘ－Ｙ轴移动（精度达微米级），带标本夹。
调焦装置：
粗调焦旋钮（快速升降） ＋ 微调焦旋钮（精细对焦，精度约２μｍ）。
物镜转换器：
可旋转切换不同倍数物镜，保持齐焦（切换后仅需微调）。
３． 照明系统
透射光源：
卤素灯（色温接近日光）或ＬＥＤ灯（节能、长寿命），亮度可调。
柯勒照明（Ｋöｈｌｅｒ Ｉｌｌｕｍｉｎａｔｉｏｎ）：
标准配置，确保光线均匀、无眩光，提升成像质量。
工作原理
光路路径：
光源 → 聚光镜 → 样本（透射）→ 物镜 → 目镜／摄像头 → 人眼或成像设备。放大与分辨：
物镜初级放大实像 → 目镜二次放大虚像。
分辨率极限：≈２００ｎｍ（可见光波长限制），油镜可提升至≈１４０ｎｍ。
关键特点
| 特性 | 说明 |
|---|---|
| 样本类型 | 需制备为薄切片／涂片（厚度≤１０μｍ），置于载玻片上，加盖玻片封片。 |
| 成像模式 | 主要支持明场观察（Ｂｒｉｇｈｔｆｉｅｌｄ），可选配相差、暗场、荧光等模块扩展功能。 |
| 操作方式 | 观察时物镜接近样本，需避免镜头触碰玻片（高倍镜工作距离短，油镜仅０．１ｍｍ）。 |
| 适用场景 | 固定样本的精细结构观察（如细胞核、染色体、病原体）。 |
应用领域
医学诊断：
病理学（组织切片癌变分析）、血液学（血涂片寄生虫检测）。
生物学研究：
细胞形态学、微生物鉴定（细菌／真菌）、植物解剖。
教学与培训：
高校实验室基础显微观察教学。
工业质检：
材料表面缺陷、纤维结构分析（需反射光配件）。
正置 ｖｓ． 倒置显微镜
| 特性 | 正置显微镜 | 倒置显微镜 |
|---|---|---|
| 物镜位置 | 样本上方 | 样本下方 |
| 适用样本 | 薄切片、玻片固定样本 | 活细胞（培养皿／培养瓶）、厚组织块 |
| 工作距离 | 较短（高倍镜易触玻片） | 较长（可直接观察培养容器底部） |
| 主要用途 | 病理切片、固定细胞 | 细胞培养、活体观察 |
技术演进与高端配置
模块化扩展：
荧光附件：激发块＋汞灯／ＬＥＤ光源，用于特异性标记（如免疫荧光）。
相差环：观察未染色活细胞的内部结构。
ＤＩＣ（微分干涉相衬）：提升三维立体感与对比度。
数字化升级：
内置摄像头 → 实时图像采集、测量分析软件（细胞计数、尺寸测量）。
电动化：自动聚焦、载物台扫描、多视野拼接。
共聚焦兼容：
部分高端正置镜可升级为激光共聚焦显微镜，实现光学切片与３Ｄ重构。
使用注意事项
玻片清洁：避免指纹或灰尘影响成像。
油镜操作：
滴浸油后轻调避免产生气泡，使用后立即用二甲苯拭镜纸清洁油渍。
光源管理：
关闭光源前调至最低亮度，延长灯泡寿命；汞灯需冷却后重启。
防震防潮：
放置稳定平台，存放于干燥环境（避免镜头霉变）。
选购要点
| 参数 | 建议 |
|---|---|
| 光学质量 | 物镜需镀膜（消色差／平场复消色差），支持齐焦性。 |
| 照明类型 | ＬＥＤ光源优于卤素灯（低发热、长寿命）。 |
| 扩展性 | 预留荧光／ＤＩＣ接口，兼容数字化配件。 |
| 品牌与售后 | 尼康、奥林巴斯、蔡司、徕卡等主流品牌，确保维修与校准支持。 |
总结
正置生物显微镜是微观世界观察的基石设备，以其对固定样本的高分辨率成像能力，成为生命科学和医学诊断的必备工具。随着模块化与数字化发展，其功能已从基础形态学拓展至多维动态分析，持续推动科研与临床的进步。
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